視頻顯微鏡的聚光器也叫集光器，由聚光鏡和可變光闌組成。聚光鏡由一片或數片透鏡組成，其作用相當于凸透鏡，起聚光的作用，以增強射入物鏡的光線。可變光闌也叫光圈，位于聚光鏡的下方，由十幾片金屬薄片組成，中心部呈圓孔。推動可變光闌的把手可以任意調節孔徑的大小，其作用是通過調節光強度，使聚光鏡的數值孔徑和物鏡的數值孔徑相一致。可變光闌開得越大，則數值孔徑越大；反之，則數值孔徑越小。
視頻顯微鏡的反光鏡一般裝在聚光器下方的鏡座上，可以在水平和直方向任意旋轉。它的一面是平面鏡，另一面是凹面鏡，其作用是使光源發出的光或自然光射向聚光鏡。光強時用平面鏡，光弱時用凹面鏡。有的顯微鏡的人工光源安裝在鏡座內，其反光鏡也固定在鏡座內。
由單透鏡構成的放大鏡和由透鏡組成的實體顯微鏡(解剖鏡)稱單式顯微鏡生物學教學及科研所用的光學顯微鏡一般是復式顯微鏡。
由外界入射的光線經反光鏡反射向上，或由內光源發射的光線經集光鏡向上，再經聚光鏡會聚在被檢標本上，使標本得到足夠的照明，由標本反射或折射出的光線經物鏡進入使光軸與水平面傾斜45
度角的棱鏡，在目鏡的焦平面上，即在目鏡的視場光闌處，成放大的側光實像，該實像再經目鏡的接目透鏡放大成虛像，所以人們看到的是虛像。
被檢物體經顯微鏡的物鏡和目鏡放大后的總放大倍數是物鏡的放大倍數和目鏡放大倍數的乘積。如用放大40倍的物鏡和放大10倍的目鏡的總放大倍數是400倍。
